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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務
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后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.2-7.6），分子病理技術服務，含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。
原位雜交的預雜交：濕盒的準備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時。吸取多余液體，不洗。
雜交——按每張切片20μι雜交液，加在切片上。將原位雜交專1用蓋玻片的保護膜揭開后，蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過夜(根據雜交情況可以調節)。
雜交后洗滌：揭掉蓋玻片，37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次；37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色，重復0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。
原位末端凋亡檢測（Tunel）
實驗原理： TUNEL技術可對組織或細胞中凋亡小體或單個凋亡細胞進行染色，能準確反映細胞凋亡典型的生物化學和形態特征。凋亡細胞內內源性核酸內切酶被而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點，利用脫氧核苷酸末端轉移酶將標有標記物(如，生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉移到3-OH末端，再用組化法或熒光檢測凋亡細胞。
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第3年
