植物組織RNA原位雜交檢測技術服務-科銳諾生物科技(圖)
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武漢科銳諾生物科技有限公司
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首先,分子病理診斷為的診斷及鑒別診斷提供了依據,當遇到少見疑難或罕見病例時,尤其是通過形態學和免yi組化染色仍不能確定的類型,這時候就需要借助分子病理技術,從基因水平來判斷疾病的異常情況,協助病理醫生作出相對準確的診斷并判斷該疾病的預后及轉歸。應用領域廣泛的要數軟組織和骨、淋巴造血系統,因為這些系統的相似而不同,單靠鏡下表現和已知的已無法滿足診斷需求。另外,分子病理檢測也常常運用在分子分型中,比如大家熟知的分子分型,植物組織RNA原位雜交檢測技術服務,通過基因表達譜研究,可將分為管腔A型、B型,HER-2陽性型,基底樣型。

原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

水稻種子是人類重要的食物來源,其發育涉及一個復雜的調控網絡,其中轉錄因子發揮了關鍵作用。MADS轉錄因子家族成員是植物花器1官發育的重要調控因子,已有的研究表明,幾乎所有的水稻MADS基因都在種子中表達,但對MADS家族成員參與水稻種子發育調控的研究結果仍比較少。
在這項研究中,研究組基于前期的表達譜研究基礎,分析得到了一個在水稻生殖發育階段優先表達的轉錄因子MADS29。細致分析表明,MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達,且在受精后的母體組織表達量高。MADS29的反義轉1基因植株呈現種子皺縮、淀粉粒形態異常、灌漿速率下降等表型。通過解剖學切片、末端轉移酶標記實驗和全基因組表達譜芯片分析等,研究人員證明了MADS29通過調控程序化死1亡(PCD)過程促進珠心細胞和珠心突起處的降解。進一步的體外凝膠阻滯實驗顯示,MADS29能夠通過直接結合程序化死1亡相關基因的啟動子區域而調控其表達,進而影響胚乳發育。

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