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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交檢測-原位雜交-武漢貝科新肽公司

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原位雜交第二天

1.

1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。

2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。

3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。

4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復一次。

2.

1)用MABT洗兩次,每次五分鐘,原位雜交,放在搖床輕輕搖動。

2)室溫下加1ml 1:2:7溶液,時間為一小時。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連,原位雜交檢測,4C 冰箱過夜。

多彩色熒光原位雜交技術多彩色熒光原位雜交(Multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)是在熒光原位雜交技術的基礎上發展起來的一種新技術,它用幾種不同顏色的熒光素單獨或混合標記的探針進行原位雜交,能同時檢測多個靶位,各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同,ISH,呈現多種色彩,因而被稱為多彩色熒光原位雜交。它克服了FISH技術的局限,能同時檢測多個基因,在檢測遺傳物質的突變和染色體上基因定位等方面得到了廣泛的應用

FISH技術的基本步驟包括探針制備、樣品預處理、探針與樣品的雜交、信號檢測和圖像分析等。在探針制備過程中,使用熒光標記物代替同位素標記物來標記探針。在樣品預處理過程中,動物組織原位雜交,細胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質等操作都是必要的,以提高探針與目標序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中,探針與樣品中的目標序列進行互補性雜交,形成可檢測的熒光信號。在信號檢測和圖像分析過程中,使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測熒光信號并獲取高分辨率的細胞圖像。

原位雜交檢測-原位雜交-武漢貝科新肽公司由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司是從事“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”的企業,公司秉承“誠信經營,用心服務”的理念,為您提供更好的產品和服務。歡迎來電咨詢!聯系人:夏先生。

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