全自動核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,微型全自動核酸提取儀,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,微型全自動核酸提取儀報價,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能完全的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,微型全自動核酸提取儀多少錢,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉移到下一個步驟相應的反應孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨立溫控,這樣可以設置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機要能帶動磁棒進行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現實的問題,96個磁力棒在從一個板轉移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。
全自動核酸提取儀如何操作呢?
核酸提取儀配套試劑及其操作步驟,買了儀器后一定要考慮后續使用配套試劑的問題:
1)配套試劑是否齊全。不同樣本類型的提取試劑盒產品鏈是否完整
2)配套試劑是不是預封裝。非預封裝的試劑需要實驗員用移液器加入裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑,并沒有減少人工操作時間;
3)提取前除了加樣本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并沒有掌握裂解液中預封裝蛋白酶K且常溫儲存的技術,蛋白酶K需要-20℃單獨保存,需即用即加。每個樣本多加一步蛋白酶K,96個樣本多了10~15min左右的操作時間。
4)配套試劑的保存溫度。有些廠家的提取試劑需要在2—8℃運輸保存,冷鏈運輸增加運輸成本,保存需要在冰箱中,而預封裝提取試劑體積較大,微型全自動核酸提取儀價格,在用量大特別像新冠這樣大批量的使用,完全沒有足夠冰箱可以進行一段時間試劑的儲存空間。
5)提取后的擴增效率。提取核酸時觀察磁珠殘留率并且檢測提取核酸質量!
全自動核酸提取儀的作用
隨著分子生物學技術的高速發展,以核酸雜交、核酸擴增及核酸序列分析等為代表的分子診斷和檢測技術的重要作用日益凸顯。樣品前處理所花費的時間占整個分析過程的60%,而檢測誤差的90%出現在前處理領域。核酸提取作為分子診斷實驗關鍵的一步,其獲得的核酸質量優劣直接影響到下游分子生物學試驗的成敗。
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