植物組織原位雜交技術在植物基因表達和調控研究中具有廣泛的應用。它可以用來研究植物發育、生長、逆境響應等方面的基因表達模式和調控機制。例如,可以利用該技術研究植物中的轉錄因子、信號轉導通路、代謝途徑等基因的表達和調控。此外,植物組織原位雜交技術還可以用來鑒定植物中的病原體、檢測植物等方面。
總之植物組織原位雜交技術是一種重要的分子生物學技術,可以用來研究植物基因的表達和調控。它具有操作簡便、結果可靠、應用廣泛等優點,是植物分子生物學研究中不可或缺的工具。
菌落的裂解及DNA結合于纖維素濾膜
(1) 在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,將濾膜放到小洼上,展平保鮮膜,使濾膜均勻濕潤,讓濾膜留于原處2-3分鐘。
(2) 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜,用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復步驟(1)。
(3) 吸干濾膜,將濾膜轉移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4)的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜,再重復一次該步驟。
(4) 吸干濾膜,把它轉移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4)的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜,轉移到一張干的濾紙上,置于室溫20-30分鐘,使濾膜干燥。
(5) 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間,熒光原位雜交,在真空烤箱中于80℃干烤2小時,固定DNA。
(6) 將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。
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