生物領域應用原位雜交技術的例子:
物種進化與系統發生學研究:在物種進化與系統發生學研究中,原位雜交技術可以用于檢測物種之間的親緣關系和進化歷程。例如,可以比較不同物種之間特定基因序列的差異,原位雜交技術,進而研究它們的親緣關系和進化歷程。
原位雜交技術在基因表達和調控、細胞分化與發育、研究和物種進化與系統發生學等領域都有廣泛的應用價值,為深入探究生命現象、促進生物技術的發展提供了有力的技術支持。
將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,湖北原位雜交,盛濾膜的容器應蓋嚴,以防液體蒸發。
雜交結束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,熒光原位雜交,并將濾膜至少翻轉一次。重復洗 一次,同時應避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次,每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件,可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
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