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分子病理技術服務-科銳諾生物科技

詢盤留言 |投訴|申領|刪除 產品編號:591875204                    更新時間:2025-02-09
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原位雜交雜交液注意事項:

       (1)雜交液內除含一定濃度的標記探針外,還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等。

       (2)雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加,可以減低探針與組織標本之間的靜電結合。甲酰胺可使Tm降低,雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA:RNA,RNA:DNA,DNA:DNA的雜交溫度降低0.35℃,0.5℃和0.65℃。,所以雜交液中加入適量的甲酰胺,可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態結構的破壞以及標本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結合,從而減少雜交液的有效容積,提高探針有效濃度,以達到提高雜交率的目的(尤其對雙鏈核酸探針)。

       在雜交液中加入牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等,分子病理技術服務,都是為了阻斷探針與組織結構成分之間的非特異性結合,以減低背景。

將少數菌落轉移到纖維素濾膜上

(1) 在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。

(2) 用無菌牙簽將各個菌落先轉移至濾膜上,再轉移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應按一定的格子進行劃線接種(或打點)。每菌落應分別劃線于兩個平板的相同位置上。后,在濾膜和主平板上同時劃一個含有非重組質粒的菌落。

(3) 倒置平板,于37℃培養至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。

(4) 用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂,在3個以上的不對稱位置作標記。在主平板大致相同的位置上也作上標記。

(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置貯放于4℃,直至獲得雜交反應的結果。

(6) 裂解細菌,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結合于纖維素濾膜。

目前,我國已穩定開展的分子病理技術主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、基因芯片和DNA測序技術DNA原位雜交主要用于基因定位、特異基因(如病原微生物基因)檢測等;RNA原位雜交則用于基因表達檢測。原位雜交技術的優點是操作簡單,可直接定位組織,價格低廉,信號穩定,儲存方便,可做組織學評價,是目前應用較多的分子病理技術之一。

分子病理技術服務-科銳諾生物科技由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司在技術合作這一領域傾注了諸多的熱忱和熱情,科銳諾一直以客戶為中心、為客戶創造價值的理念、以品質、服務來贏得市場,衷心希望能與社會各界合作,共創成功,共創輝煌。相關業務歡迎垂詢,聯系人:王經理。

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