原位雜交-原位雜交檢測-貝科新肽(推薦商家)
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武漢貝科新肽科技有限公司
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RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,熒光原位雜交,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,染色體原位雜交,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體(Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的分子病理學技術,原位雜交檢測,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

原位雜交技術在其他生物領域也有廣泛的應用,例如:
動物行為學研究:在動物行為學中,原位雜交技術可以用于檢測動物行為與基因表達之間的關系。例如,通過比較不同行為狀態下動物腦組織中基因表達的差異,原位雜交,可以揭示特定基因對動物行為的影響。
生物技術應用:原位雜交技術在生物技術領域也有廣泛應用,例如在基因、基因編輯和開發等方面。例如,通過原位雜交技術可以定位和特定基因,為基因和基因編輯提供基礎數據和工具。

雜交 (1) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉到200ml預洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養箱內的旋轉平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。(4) 將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預雜交1-2小時。

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